Rojo Nilo

rojo Nilo (también conocido como oxazona azul Nilo) es un tinte lipófilo. El rojo Nilo tiñe de amarillo las gotitas de lípidos intracelulares. En la mayoría de los disolventes polares, el rojo Nilo no emite fluorescencia; sin embargo, cuando se encuentra en un ambiente rico en lípidos, puede ser intensamente fluorescente, con colores variables desde el rojo intenso (para los lípidos de la membrana polar) hasta una fuerte emisión de color amarillo dorado (para los lípidos neutros en depósitos intracelulares). El tinte es altamente solvatocrómico y su longitud de onda de emisión y excitación cambia dependiendo de la polaridad del solvente y en medios polares apenas emitirá fluorescencia.

El rojo del Nilo tiene aplicaciones en biología celular, donde puede usarse como colorante de membrana que puede visualizarse fácilmente usando un microscopio de epifluorescencia con longitudes de onda de excitación y emisión generalmente compartidas con la proteína fluorescente roja. El rojo del Nilo también se ha utilizado como parte de un proceso de detección sensible de microplásticos en agua embotellada. Además, el rojo del Nilo es un candidato notable en la fabricación de membranas para diferentes sensores para detectar cambios ambientales, como sabor, gas, pH, etc.

En los triglicéridos (un lípido neutro), el rojo del Nilo tiene un máximo de excitación de aproximadamente 515 nm (verde) y un máximo de emisión de aproximadamente 585 nm (amarillo-naranja). Por el contrario, en los fosfolípidos (lípidos polares), el rojo del Nilo tiene un máximo de excitación de aproximadamente 554 nm (verde) y un máximo de emisión de aproximadamente 638 nm (rojo).

Se ha informado que el coeficiente de difusión del rojo del Nilo en etanol es de 470 μm²/s.

Síntesis

El rojo del Nilo se puede preparar mediante hidrólisis ácida hirviendo una solución de azul del Nilo con ácido sulfúrico. Este proceso reemplaza un grupo iminio por un grupo carbonilo. Alternativamente, el rojo del Nilo y sus análogos (colorantes de naftooxazina) se pueden preparar mediante condensación catalizada por ácido de los correspondientes 5-(dialquilamino)-2-nitrosofenoles con 2-naftol. Los rendimientos son generalmente moderados ya que en este procedimiento no se utiliza ningún cooxidante. Dado que la reacción para generar rojo del Nilo generalmente no agota por completo el suministro de azul del Nilo, se requieren pasos de separación adicionales si se necesita rojo del Nilo puro.

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  Nilo rojo bajo luz visible y ultravioleta (366 nm) en diferentes solventes. De izquierda a derecha: 1. agua, 2. metanol, 3. etanol, 4. acetonitrile, 5. dimetilformamida, 6. acetone, 7. acetato de etilo, 8. diclorometano, 9. n-hexane, 10. metil-tert-butylether, 11. cyclohexane, 12. toluene.
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  Bacillus subtilis manchado con Nilo rojo como un tinte de membrana (muestra en rojo). Esta cepa crece en parte como cadenas celulares, por lo que un tinte de membrana puede ser útil para distinguir los límites internos de las células.