Tinción con ácido periódico-Schiff

El ácido periódico de Schiff (PAS) es un método de tinción utilizado para detectar polisacáridos como el glucógeno y mucosustancias como glicoproteínas, glicolípidos y mucinas en los tejidos. La reacción del ácido periódico oxida los dioles vecinos en estos azúcares, generalmente rompiendo el enlace entre dos carbonos adyacentes que no participan en el enlace glicosídico o en el cierre del anillo en el anillo de las unidades de monosacáridos que forman parte de los polisacáridos largos, y creando un par. de aldehídos en las dos puntas libres de cada anillo de monosacárido roto. La condición de oxidación debe estar suficientemente regulada para no oxidar más los aldehídos. Estos aldehídos luego reaccionan con el reactivo de Schiff para dar un color púrpura magenta. A menudo se utiliza un tinte básico adecuado como contratinte.

• La tinción PAS diastasa (PAS-D) es una tinción PAS que se utiliza en combinación con la diastasa, una enzima que descompone el glucógeno.

• Azul alcián/ácido periódico: Schiff (AB/PAS o AB-PAS) utiliza azul alcián antes del paso PAS.

Usos

La tinción con PAS se utiliza principalmente para teñir estructuras que contienen una alta proporción de macromoléculas de carbohidratos (glucógeno, glicoproteína, proteoglicanos), que normalmente se encuentran, por ejemplo, en proteínas. Tejidos conectivos, moco, glucocáliz y láminas basales.

La tinción PAS se puede utilizar para ayudar en el diagnóstico de varias afecciones médicas:

• Enfermedad de almacenamiento de glucogeno (versus otros trastornos de almacenamiento).
• Adenocarcinomas, que a menudo secretan mucinas neutrales.
• Enfermedad de la mama.
• Alveolar parte blanda sarcoma.
• Mantener macrófagos en la enfermedad de Whipple.
• Se puede utilizar para diagnosticar la deficiencia de α1-antitripsina si los hepatocitos hepáticos periportales manchan positivo.
• Aggregates of PAS-positive linfocitos are present in epidermis in Mycosis fungoides and Sézary symbol, called Pautrier microabsceses.
• Sarcoma de Ewing
• Eritroleucemia, leucemia de glóbulos rojos inmaduros. Estas células manchan una fuchsia brillante.
• Proteína alveolar pulmonar.
• Infección fúngica, las paredes celulares de hongos mancha magenta; esto sólo funciona en hongos vivos. En contraste, la mancha de plata de metentamina de Grocott manchará organismos fungosos vivos y muertos.
• Se utiliza para identificar glucógeno en especímenes de biopsia pulmonar de bebés con glucogenosis intersticial pulmonar (PIG).
• Se puede utilizar para destacar las inclusiones de lípidos superenlazados en la lipofuscinosis ceroide (NCL).

La presencia de glucógeno se puede confirmar en una sección de tejido usando diastasa para digerir el glucógeno de una sección y luego comparando una sección de PAS digerida con diastasa con una sección de PAS normal. El portaobjetos negativo para diastasa mostrará una tinción magenta donde hay glucógeno presente dentro de una sección de tejido. El portaobjetos que ha sido tratado con diastasa carecerá de tinción PAS positiva en esas ubicaciones del portaobjetos.

La tinción PAS también se utiliza para teñir celulosa. Un ejemplo sería buscar dispositivos médicos implantados compuestos de celulosa no oxidada.

Si la tinción PAS se realizará en tejido, el fijador recomendado es formalina tamponada neutra al 10 % o solución de Bouin. Para frotis de sangre, el fijador recomendado es el metanol. No se recomienda el glutaraldehído porque puede haber grupos aldehído libres disponibles para reaccionar con el reactivo de Schiff, lo que puede dar como resultado una tinción falsamente positiva.