Rojo de metilo
| Metil Rojo (pH indicador) | ||
| infra pH 4.4 | arriba pH 6.2 | |
| 4.4 | ⇌ | 6.2 |
Rojo de metilo (ácido 2-(N,N-dimetil-4-aminofenil)azobencenocarboxílico), también llamado C.I. Acid Red 2, es un colorante indicador que se vuelve rojo en soluciones ácidas. Es un colorante azoico y es un polvo cristalino de color rojo oscuro. El rojo de metilo es un indicador de pH; es rojo con un pH inferior a 4,4, amarillo con un pH superior a 6,2 y naranja en el medio, con un pKa de 5,1. Se investigan la murexida y el rojo de metilo como potenciadores prometedores de la destrucción sonoquímica de los contaminantes de hidrocarburos clorados. El rojo de metilo está clasificado por la IARC en el grupo 3, sin clasificar en cuanto a su potencial cancerígeno en humanos.
Preparación
Como colorante azoico, el rojo de metilo se puede preparar mediante diazotación de ácido antranílico, seguida de reacción con dimetilanilina:
Propiedades
El rojo de metilo muestra fotocromismo dependiente del pH, y la protonación hace que adopte una estructura de hidrazona/quinona.
El rojo de metilo tiene un uso especial en histopatología para mostrar la naturaleza ácida del tejido y la presencia de organismos con paredes celulares de naturaleza ácida.
El rojo de metilo es detectablemente fluorescente en agua:metanol 1:1 (pH 7,0), con un máximo de emisión a 375 nm (UVA) tras la excitación con luz de 310 nm (UVB).
Prueba de rojo de metilo
En microbiología, el rojo de metilo se utiliza en la prueba de rojo de metilo (prueba MR), utilizada para identificar bacterias que producen ácidos estables mediante mecanismos de fermentación ácida mixta de la glucosa (cf. prueba de Voges-Proskauer) .
La prueba de RM, la prueba "M" Parte de las cuatro pruebas IMViC, se utiliza para identificar bacterias entéricas según su patrón de metabolismo de la glucosa. Todos los entéricos producen inicialmente ácido pirúvico a partir del metabolismo de la glucosa. Posteriormente, algunos entéricos utilizan la vía de los ácidos mixtos para metabolizar el ácido pirúvico en otros ácidos, como el láctico, el acético y el fórmico. Estas bacterias se denominan rojas de metilo positivas e incluyen Escherichia coli y Proteus vulgaris. Otros entéricos utilizan posteriormente la vía del butilenglicol para metabolizar el ácido pirúvico hasta obtener productos finales neutros. Estas bacterias se denominan rojo de metilo negativo e incluyen Serratia marcescens y Enterobacter aerogenes.
Proceso
Se inocula un tubo lleno con un caldo de glucosa y fosfato con un asa de transferencia estéril. El tubo se incuba a 35 °C (95 °F) durante 2 a 5 días. Después de la incubación, se transfieren 2,5 ml del medio a otro tubo. A este tubo se añaden cinco gotas del indicador de pH rojo de metilo. El tubo se hace rodar suavemente entre las palmas para dispersar el rojo de metilo.
Resultados esperados
Las sustancias entéricas que posteriormente metabolizan el ácido pirúvico en otros ácidos reducen el pH del medio a 4,2. A este pH, el rojo de metilo se vuelve rojo, una prueba positiva. Los entéricos que posteriormente metabolizan el ácido pirúvico a productos finales neutros reducen el pH del medio a sólo 6,0. A este pH, el rojo de metilo es amarillo, una prueba negativa.