Prueba de fijación del complemento

La prueba de fijación del complemento es una prueba médica inmunológica que se puede utilizar para detectar la presencia de un anticuerpo específico o de un antígeno específico en el suero de un paciente, en función de si se produce o no fijación del complemento. Se utilizó ampliamente para diagnosticar infecciones, particularmente con microbios que no se detectan fácilmente mediante métodos de cultivo, y en enfermedades reumáticas. Sin embargo, en los laboratorios de diagnóstico clínico ha sido reemplazado en gran medida por otros métodos serológicos como ELISA y por métodos de detección de patógenos basados en ADN, en particular la PCR.

El sistema del complemento es un sistema de proteínas séricas que reaccionan con complejos antígeno-anticuerpo. Si esta reacción ocurre en la superficie de una célula, dará como resultado la formación de poros transmembrana y, por lo tanto, la destrucción de la célula. Los pasos básicos de una prueba de fijación del complemento son los siguientes:

1. El suero está separado del paciente.
2. Los pacientes tienen naturalmente diferentes niveles de proteínas complementarias en su suero. Para negar cualquier efecto que esto pueda tener en la prueba, las proteínas complementarias en el suero del paciente deben ser destruidas y reemplazadas por una cantidad conocida de proteínas de complemento estandarizadas.
   1. El suero se calienta de tal manera que todas las proteínas complementarias —pero ninguna de las anticuerpos— se destruyen. (Esto es posible porque las proteínas de complemento son mucho más susceptibles a la destrucción por calor que los anticuerpos.)
   2. Una cantidad conocida de proteínas de complemento estándar se añaden al suero. (Estas proteínas se obtienen con frecuencia del suero de cobaya).
3. El antígeno de interés se añade al suero.
4. Se agregan al suero los glóbulos rojos de oveja (sRBCs) que han sido pre-bound a anticuerpos anti-sRBC. La prueba se considera negativa si la solución se vuelve rosa en este punto y positiva de otra manera.

Si el suero del paciente contiene anticuerpos contra el antígeno de interés, se unirán al antígeno en el paso 3 para formar complejos antígeno-anticuerpo. Las proteínas del complemento reaccionarán con estos complejos y se agotarán. Por lo tanto, cuando se añaden los complejos sRBC-anticuerpo en el paso 4, no quedará complemento en el suero. Sin embargo, si no hay anticuerpos contra el antígeno de interés, el complemento no se agotará y reaccionará con los complejos sRBC-anticuerpo agregados en el paso 4, lisando los sRBC y derramando su contenido en la solución, tornando así la solución de color rosa. .

Si bien la detección de anticuerpos es el formato de prueba más común, es igualmente posible probar la presencia de antígeno. En este caso, el suero del paciente se complementa con anticuerpos específicos para inducir la formación de complejos; La adición del complemento y del indicador sRBC se realiza como antes.

La prueba puede hacerse cuantitativa configurando una serie de diluciones de suero del paciente y determinando el factor de dilución más alto que aún producirá una prueba de FQ positiva. Este factor de dilución corresponde al título.

• Complemento+Fixación+Tests en la Biblioteca Nacional de Medicina de los EE.UU.