Lipofectamina
Lipofectamina o Lipofectamina 2000 es un reactivo de transfección común, producido y vendido por Invitrogen, que se utiliza en biología molecular y celular. Se utiliza para aumentar la eficiencia de la transfección de ARN (incluidos ARNm y ARNi) o ADN plasmídico en cultivos celulares in vitro mediante lipofección. La lipofectamina contiene subunidades lipídicas que pueden formar liposomas en un entorno acuoso, que atrapan la carga útil de transfección, por ejemplo, plásmidos de ADN.
La lipofectamina consiste en una mezcla 3:1 de DOSPA (trifluoroacetato de 2,3-dioleoiloxi-N-[2(esperminacarboxamido)etil]-N,N-dimetil-1-propaniminio) y DOPE, que forma complejos con moléculas de ácido nucleico cargadas negativamente para permitirles superar la repulsión electrostática de la membrana celular. Las moléculas lipídicas catiónicas de la lipofectamina están formuladas con un colípido neutro (lípido auxiliar). Los liposomas que contienen ADN (cargados positivamente en su superficie) pueden fusionarse con la membrana plasmática cargada negativamente de las células vivas, debido al colípido neutro que media la fusión del liposoma con la membrana celular, lo que permite que las moléculas de carga de ácido nucleico crucen hacia el citoplasma para la replicación o expresión.
Para que una célula exprese un transgén, el ácido nucleico debe llegar al núcleo de la célula para comenzar la transcripción. Sin embargo, el material genético transfectado puede no llegar nunca al núcleo en primer lugar, sino que se altera en algún punto del proceso de entrega. En las células en división, el material puede llegar al núcleo al quedar atrapado en la envoltura nuclear que se reensambla después de la mitosis. Pero también en las células que no se dividen, la investigación ha demostrado que la lipofectamina mejora la eficiencia de la transfección, lo que sugiere que además ayuda al material genético transfectado a penetrar la envoltura nuclear intacta.
Este método de transfección fue inventado por el Dr. Yongliang Chu.
Véase también
- Lipofection
- Transfection
- Vectores en terapia génica
- Libio cationico
Referencias
- ^ a b Invitrogen (2012). "Lipofectamina 2000 Reagente."
- ^ Yang, J., Huang, L. maduración dependiente del tiempo del complejo de lipososis cínico-DNA para la resistencia al suero. Gene Ther 5, 380–387 (1998). https://doi.org/10.1038/sj.gt.3300596
- ^ a b c d e f Dalby B, Cates S, Harris A, Ohki EC, Tilkins ML, Price PJ, Ciccarone VC (junio de 2004). "Transfección avanzada con reactivo de Lipofectamina 2000: neuronas primarias, siRNA y aplicaciones de alto rendimiento". Métodos. 33 2): 95–103. doi:10.1016/j.ymeth.2003.11.023. PMID 15121163.
- ^ US Active US7479573B2, Yongliang Chu; Malouk Masoud " Gulliat Gebeyehu, "Transfection reagents", asignado a Life Technologies Corp and Invitrogen Group
US Active US7479573B2, Yongliang Chu; Malek Masoud y Gulliat Gebeyehu, "Reactivos de transfección", asignados a Life Technologies Corp e Invitrogen Group