Fraccionamiento celular

En biología celular, el fraccionamiento celular es el proceso utilizado para separar los componentes celulares preservando las funciones individuales de cada componente. Este es un método que se utilizó originalmente para demostrar la ubicación celular de varios procesos bioquímicos. Otros usos del fraccionamiento subcelular son proporcionar una fuente enriquecida de una proteína para una mayor purificación y facilitar el diagnóstico de diversos estados patológicos.

Homogeneización

El tejido normalmente se homogeneiza en una solución tampón que es isotónica para detener el daño osmótico. Los mecanismos de homogeneización incluyen triturar, picar, picar, cambios de presión, choque osmótico, congelación-descongelación y ultrasonido. Luego, las muestras se mantienen frías para evitar daños enzimáticos. Es la formación de una masa homogénea de células (homogeneizado celular o suspensión celular). Implica triturar células en un medio adecuado en presencia de determinadas enzimas con el pH, la composición iónica y la temperatura correctos. Por ejemplo, la pectinasa que digiere la laminilla media entre las células vegetales.

Filtración

Es posible que este paso no sea necesario según la fuente de las células. Sin embargo, es probable que el tejido animal produzca tejido conectivo que debe eliminarse. Comúnmente, la filtración se logra vertiendo a través de una gasa o con un filtro de succión y el filtro cerámico de grado correspondiente.

Purificación

La purificación se logra mediante centrifugación diferencial: el aumento secuencial de la fuerza gravitacional da como resultado la separación secuencial de orgánulos según su densidad.