Ensayo de liberación de interferón gamma

Los ensayos de liberación de interferón-γ (IGRA) son pruebas médicas que se utilizan en el diagnóstico de algunas enfermedades infecciosas, especialmente la tuberculosis. Los ensayos de liberación de interferón-γ (IFN-γ) se basan en el hecho de que los linfocitos T liberarán IFN-γ cuando se expongan a antígenos específicos. Estas pruebas se desarrollaron principalmente para el campo del diagnóstico de la tuberculosis, pero en teoría, se pueden utilizar en el diagnóstico de otras enfermedades que dependen de la inmunidad mediada por células, por ejemplo, el citomegalovirus, la leishmaniasis y la COVID-19. Por ejemplo, en pacientes con reacciones adversas cutáneas a medicamentos, la provocación de linfocitos de sangre periférica con el medicamento que causa la reacción produjo un resultado positivo en la prueba para la mitad de los medicamentos analizados.

Actualmente existen dos ensayos de liberación de IFN-γ disponibles para el diagnóstico de la tuberculosis:

• QuantiFERON-TB Gold (licensed in US, Europe and Japan); and
• T-SPOT. TB, una forma de ELISpot, la variante de ELISA (licenciada en Europa, Estados Unidos, Japón y China).

La primera prueba cuantifica la cantidad de IFN-γ producida en respuesta a los antígenos ESAT-6 y CFP-10 de Mycobacterium tuberculosis, que se distinguen de los presentes en BCG y la mayoría de las otras micobacterias no tuberculosas. La segunda prueba determina el número total de células T efectoras individuales que expresan IFN-γ.

Las indicaciones de la prueba aún son controvertidas. Se la ha evaluado para el diagnóstico de tuberculosis latente en pacientes con VIH (que frecuentemente presentan una prueba de Mantoux negativa).

Ensayos de liberación de IFN-γ para el diagnóstico de SARS-CoV-2 (COVID-19): Las muestras de sangre se recolectaron en un conjunto de tubos con heparina de litio; el primer tubo sin estimulación se dejó como control; el segundo tubo se estimuló con un solo pool de péptidos de SARS-CoV-2 para células T CD4+ y el tercer tubo se estimuló con un pool de péptidos de SARS-CoV-2 para células T CD8+; el cuarto tubo se estimuló con mitógeno como control positivo. Un único megagrupo de células T CD4+ (grupo CD4+) estaba formado por 221 péptidos epítopos de células T CD4+ de clase II de HLA previstos que cubrían todo el proteoma viral, excepto la proteína de la espícula, que estaba cubierta por 253 péptidos de 15 meros que se superponían en 10 residuos y 2 megagrupos de células T CD8+ (grupos CD8+ A y B) que, en conjunto, constaban de 628 epítopos de células T CD8+ de clase I de HLA previstos de todo el proteoma del SARS-CoV-2. Después de una estimulación nocturna de las células T, se midió la concentración de IFN-γ en la fracción plasmática mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) en unidades internacionales por mililitro (UI/ml) (Murugesan et al, 2021).