Bacterias coliformes

bacterias coliformes se definen como bacilos gramnegativos móviles o inmóviles que no forman esporas y que poseen β-galactosidasa para producir ácidos y gases bajo su temperatura óptima de crecimiento de 35 a 37 °C. . Pueden ser aerobios o aerobios facultativos y son un indicador comúnmente utilizado de baja calidad sanitaria de los alimentos, la leche y el agua. Los coliformes se pueden encontrar en el medio acuático, en el suelo y en la vegetación; Están universalmente presentes en grandes cantidades en las heces de los animales de sangre caliente, ya que se sabe que habitan en el sistema gastrointestinal. Si bien las bacterias coliformes normalmente no son causas de enfermedades graves, son fáciles de cultivar y su presencia se utiliza para inferir que otros organismos patógenos de origen fecal pueden estar presentes en una muestra, o que dicha muestra no es segura para consumir. Dichos patógenos incluyen bacterias, virus o protozoos que causan enfermedades y muchos parásitos multicelulares.

Géneros

Los géneros típicos incluyen:

• Citrobacter son bacilli anaeróbico peritrichoso entre 0.6–6 μm de longitud. Citrobacter especies habitan flora intestinal sin causar daño, pero pueden conducir a infecciones del tracto urinario, bacteremia, abscesos cerebrales, neumonía, sepsis intra abdominal, meningitis e infecciones articulares si se les da la oportunidad. Infecciones de una Citrobacter las especies tienen una tasa de mortalidad entre el 33-48%, siendo más susceptibles los lactantes y los individuos inmunocompromisos.
• Enterobacter son los bacilos motiles, flagelados conocidos por causar infecciones como la bacteremia, las infecciones del tracto respiratorio, las infecciones del tracto urinario, las infecciones de áreas donde se produjo la cirugía, y en casos extremos meningitis, sinusitis y osteomielitis. Determinar la presencia de Enterobacter en una muestra, se cultivan primero en MacConkey agar para confirmar que son fermentación de lactosa. Una prueba de indole diferenciará Enterobacter desde Escherichia, como Enterobacter son indólares negativos y Escherichia es positivo. Enterobacter se distinguen de Klebsiella por sus diferencias en la motilidad.
• Klebsiella son bacilos no motiles, gramnegativos que van desde 1–2 μm de longitud. Son anaerobes facultativos con una cápsula compuesta de polisacáridos de ácido complejo que les permite soportar el secado durante varios meses. Klebsiella neumonía es la más común Klebsiella especies encontradas en humanos, las vías gastrointestinales de animales, en aguas residuales y en suelo. En los medios ricos en carbohidratos, Klebsiella las colonias aparecen de color blanco grisáceo con una superficie exterior mucosa. Los medios utilizados para seleccionar Klebsiella especies en una muestra mixta es un agar que incluye ornitina, raffinose y cítrato de Koser, donde miembros de este género formarán colonias amarillas y de aspecto húmedo.
• Escherichia especies normalmente habitan el intestino humano y los de otros animales de sangre caliente, y son los más comúnmente responsables de causar enfermedades en los seres humanos. E. coli específicamente es el organismo más común visto en el intestino humano y se sabe que causan una variedad de enfermedades en los seres humanos. La mayoría E. coli las cepas son motiles y han obtenido muchas de sus características de virulencia de la transferencia de genes horizontal. Hay varios patotipos diferentes de E. coli causando síndromes gastrointestinales: diarrea E. coli (DEC), enterotoxógeno E. coli (ETEC); EPEC; Shiga toxin-producingE. coli (STEC), que incluye EHEC; enteroaggregative E. coli (EAEC); y enteroinvasivo E. coli (EIEC). Hay diferentes maneras de identificar E. coli basado en la variación de sus polisacáridos O, H y K en su superficie celular o utilizando medios selectivos.

Escherichia coli (E. coli) se puede distinguir de la mayoría de los demás coliformes por su capacidad para fermentar lactosa a 44 °C en la prueba de coliformes fecales y por su crecimiento y reacción de color en ciertos tipos de medios de cultivo. Cuando se cultiva en una placa de eosina azul de metileno (EMB), se obtiene un resultado positivo para E. coli son colonias de color verde metálico en un medio de color púrpura oscuro. También se puede cultivar en Tryptone Bile X-Glucuronide (TBX) para que aparezcan como colonias azules o verdes después de un período de incubación de 24 horas. Escherichia coli tiene un período de incubación de 12 a 72 horas y la temperatura óptima de crecimiento es de 37 °C. A diferencia del grupo de coliformes generales, E. coli son casi exclusivamente de origen fecal y su presencia es, por tanto, una confirmación eficaz de la contaminación fecal. La mayoría de las cepas de E. coli son inofensivos, pero algunos pueden causar enfermedades graves en los seres humanos. Los síntomas y signos de infección incluyen diarrea con sangre, calambres estomacales, vómitos y, ocasionalmente, fiebre. La bacteria también puede causar neumonía, otras enfermedades respiratorias e infecciones del tracto urinario.

Una manera fácil de diferenciar entre diferentes tipos de bacterias coliformes es mediante el uso de una placa de agar eosina azul de metileno. Esta placa inhibe parcialmente las bacterias Gram (+) y producirá un cambio de color en las colonias de bacterias Gram (-) según la capacidad de fermentación de la lactosa. Los fermentadores de lactosa fuertes aparecerán de color azul oscuro/púrpura/negro, y las colonias de E.coli (que también fermenta la lactosa) serán de color oscuro, pero también parecerán tener un brillo verde metálico. Otras bacterias coliformes aparecerán como colonias espesas y viscosas, siendo las no fermentadoras incoloras y las fermentadoras débiles rosadas.

Incidencia de brotes de coliformes

Escherichia coli O157

A partir del 15 de noviembre de 2021, siete estados de EE. UU. declararon diez casos de enfermedades por E. coli O157: cepa H7. Estos casos se informaron desde el 15 de octubre de 2021 hasta el 27 de octubre de 2021 y el Departamento de Agricultura de Minnesota y la FDA llevaron a cabo una investigación. Se concluyó que los paquetes de espinacas recolectados en casas de personas infectadas estaban contaminados con una cepa de E. coli que coincidía con la cepa que causaba la enfermedad. Esto se determinó realizando una secuenciación del genoma completo de la cepa extraída de las espinacas y comparándola con la cepa extraída de individuos infectados.

A partir del 7 de febrero de 2022, las provincias de Alberta y Saskatchewan en Canadá informaron un total de catorce casos confirmados de E. coli enfermedades por cepa O157. Estos se informaron entre diciembre de 2021 y enero de 2022, y la Agencia de Salud Pública de Canadá (PHAC), la Agencia Canadiense de Inspección de Alimentos (CFIA) y Health Canada pudieron determinar que una marca específica de kimchi original era la fuente del organismo. . El 28 de enero de 2022 y el 6 de febrero de 2022, la CFIA emitió un retiro del mercado del kimchi original de Hankook.

Detección de bacterias coliformes en agua potable

PCR

La amplificación del gen de la beta-galactosidasa se utiliza para detectar coliformes en general, porque todos los organismos coliformes producen este compuesto. La amplificación de la beta-D glucuronidasa se utiliza para detectar E. coli, o la amplificación de su(s) gen(es) de verotoxina para detectar E. coli.

Hibridación in situ quimioluminiscente

Áreas específicas del ARNr 16S del género Enterobacteriaceae están unidas por sondas de oligonucleótidos, lo que ayuda a controlar la calidad del agua potable. En concreto, E. coli está marcado con sondas de ácido peptídico nucleico (PNA) marcadas con peroxidasa de soja que se unen a una secuencia específica en su ARNr 16S. Cuando se utiliza junto con un sustrato quimioluminiscente, se produce luz donde cada colonia de E. coli, lo que indica que están presentes en la muestra.

Agar bilis rojo violeta

El medio sólido se utiliza para cultivar coliformes fermentadores de lactosa y utiliza un indicador de pH rojo neutro. Las colonias rosadas aparecen cuando se fermenta la lactosa y están rodeadas de bilis precipitada. Para confirmar si estas colonias son coliformes, se transfieren a bilis lactosa verde brillante (BGLB) y se incuban. Si se ve gas después de la incubación, se puede confirmar que la muestra tenía coliformes presentes.

Método de filtro de membrana

Las muestras de prueba se filtran a través de papel de filtro estándar y luego se transfieren a medios M-endo o LES Endo Agar. Las colonias aparecen de color rojo rosado con un brillo metálico verde después de 22 a 24 horas de incubación. Se puede confirmar que estas colonias son coliformes si se inoculan en lauril triptosa (LST), producen gas y luego se inoculan en BGLB. Si hay producción de gas en los tubos BGLB, la prueba es positiva para la presencia de bacterias coliformes.