ADN ligasa

La ligasa de ADN es un tipo específico de enzima, una ligasa (EC 6.5.1.1) que facilita la unión de hebras de ADN al catalizar la formación de un enlace fosfodiéster. Desempeña un papel en la reparación de roturas de una sola cadena en el ADN dúplex en los organismos vivos, pero algunas formas (como la ADN ligasa IV) pueden reparar específicamente roturas de doble cadena (es decir, una rotura en ambas cadenas complementarias de ADN). Las roturas de una sola cadena son reparadas por la ADN ligasa utilizando la cadena complementaria de la doble hélice como plantilla, y la ADN ligasa crea el enlace fosfodiéster final para reparar completamente el ADN.

La ligasa de ADN se utiliza tanto en la reparación como en la replicación del ADN (consulte Ligasas de mamíferos). Además, la ADN ligasa tiene un amplio uso en laboratorios de biología molecular para experimentos de ADN recombinante (ver Aplicaciones de investigación). La ligasa de ADN purificada se usa en la clonación de genes para unir moléculas de ADN para formar ADN recombinante.

El mecanismo de la ligasa de ADN es formar dos enlaces fosfodiéster covalentes entre los extremos hidroxilo 3' de un nucleótido ("aceptor"), con el extremo fosfato 5' de otro ("donante"). Se consumen dos moléculas de ATP por cada enlace fosfodiéster formado. Se requiere AMP para la reacción de la ligasa, que se desarrolla en cuatro pasos:

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