Louis Pasteur

Louis Pasteur ForMemRS (, Francês: [lwi pastœʁ]; 27 de dezembro de 1822 – 28 de setembro de 1895) foi um químico e microbiologista francês conhecido por suas descobertas dos princípios da vacinação, fermentação microbiana e pasteurização, a última das quais recebeu seu nome. Sua pesquisa em química levou a avanços notáveis na compreensão das causas e prevenções de doenças, que estabeleceram as bases da higiene, da saúde pública e de grande parte da medicina moderna. Suas obras são creditadas por salvar milhões de vidas por meio do desenvolvimento de vacinas para raiva e antraz. Ele é considerado um dos fundadores da bacteriologia moderna e foi homenageado como o "pai da bacteriologia" e o "pai da microbiologia" (juntamente com Robert Koch; este último epíteto também atribuído a Antonie van Leeuwenhoek).

Pasteur foi responsável por refutar a doutrina da geração espontânea. Sob os auspícios da Academia Francesa de Ciências, seu experimento demonstrou que em frascos esterilizados e selados, nada jamais se desenvolvia; inversamente, em frascos esterilizados, mas abertos, os microrganismos podem crescer. Por esta experiência, a academia concedeu-lhe o Prêmio Alhumbert de 2.500 francos em 1862.

Pasteur também é considerado um dos pais da teoria microbiana das doenças, que era um conceito médico menor na época. Seus muitos experimentos mostraram que as doenças poderiam ser evitadas matando ou interrompendo os germes, apoiando diretamente a teoria dos germes e sua aplicação na medicina clínica. Ele é mais conhecido do público em geral por sua invenção da técnica de tratamento de leite e vinho para impedir a contaminação bacteriana, um processo agora chamado de pasteurização. Pasteur também fez descobertas significativas em química, principalmente na base molecular para a assimetria de certos cristais e racemização. No início de sua carreira, sua investigação do ácido tartárico resultou na primeira resolução do que hoje é chamado de isomerismo óptico. Seu trabalho abriu caminho para a compreensão atual de um princípio fundamental na estrutura dos compostos orgânicos.

Ele foi o diretor do Instituto Pasteur, fundado em 1887, até sua morte, e seu corpo foi enterrado em um jazigo sob o instituto. Embora Pasteur tenha feito experimentos inovadores, sua reputação tornou-se associada a várias controvérsias. A reavaliação histórica de seu caderno revelou que ele praticou a trapaça para superar seus rivais.

Educação e início da vida

Retratos dos pais de Pasteur, pintados por si mesmo

A casa em que Pasteur nasceu, Dole

Louis Pasteur nasceu em 27 de dezembro de 1822, em Dole, Jura, França, em uma família católica de um pobre curtidor. Ele era o terceiro filho de Jean-Joseph Pasteur e Jeanne-Etiennette Roqui. A família mudou-se para Marnoz em 1826 e depois para Arbois em 1827. Pasteur entrou na escola primária em 1831. Ele era disléxico e disgráfico.

Ele foi um aluno mediano em seus primeiros anos, e não particularmente acadêmico, pois seus interesses eram pescar e desenhar. Ele desenhou muitos pastéis e retratos de seus pais, amigos e vizinhos. Pasteur frequentou a escola secundária no Collège d'Arbois. Em outubro de 1838, ele partiu para Paris para ingressar na Pensão Barbet, mas ficou com saudades de casa e voltou em novembro.

Em 1839, ele entrou no Collège Royal em Besançon para estudar filosofia e obteve seu diploma de bacharel em letras em 1840. Ele foi nomeado tutor no colégio de Besançon enquanto continuava um curso de graduação em ciências com matemática especial. Ele foi reprovado em seu primeiro exame em 1841. Ele conseguiu passar no grau baccalauréat scientifique (ciência geral) de Dijon, onde obteve seu diploma de bacharel em matemática (Bachelier ès Sciences Mathématiques) em 1842, mas com uma nota medíocre em química.

Mais tarde, em 1842, Pasteur fez o teste de admissão para a École Normale Supérieure. Ele passou no primeiro conjunto de testes, mas como sua classificação era baixa, Pasteur decidiu não continuar e tentar novamente no ano seguinte. Ele voltou para a Pensão Barbet para se preparar para o teste. Ele também frequentou aulas no Lycée Saint-Louis e palestras de Jean-Baptiste Dumas na Sorbonne. Em 1843, passou no teste com alta classificação e ingressou na École Normale Supérieure. Em 1845 recebeu o grau de licencié ès sciences. Em 1846, foi nomeado professor de física no Collège de Tournon (agora chamado Lycée Gabriel-Faure) em Ardèche. Mas o químico Antoine Jérôme Balard o queria de volta na École Normale Supérieure como assistente de laboratório graduado (agrégé préparateur). Ele se juntou a Balard e simultaneamente iniciou sua pesquisa em cristalografia e, em 1847, apresentou suas duas teses, uma em química e outra em física: (a) Tese de Química: "Recherches sur la capacité de saturation de l' ácido arsénieux. Etudes des arsénites de potasse, de soude et d'ammoniaque."; (b) Tese de Física: "1. Études des phénomènes relatifs à la polarization rotatoire des liquides. 2. Application de la polarization rotatoire des liquides à la solution de diversas questões de chimie."

Depois de servir brevemente como professor de física no Dijon Lycée em 1848, tornou-se professor de química na Universidade de Estrasburgo, onde conheceu e cortejou Marie Laurent, filha do reitor da universidade em 1849. Eles eram casou-se em 29 de maio de 1849 e teve cinco filhos, dos quais apenas dois chegaram à idade adulta; os outros três morreram de febre tifóide.

Carreira

Louis Pasteur, biólogo e químico francês, 1878, de A Gerschel

Pasteur foi nomeado professor de química na Universidade de Estrasburgo em 1848 e tornou-se a cadeira de química em 1852.

Em fevereiro de 1854, para ter tempo de realizar trabalhos que lhe valessem o título de correspondente do Instituto, recebeu três meses de licença. licença remunerada com a ajuda de um atestado médico de conveniência. Ele estendeu a licença até 1º de agosto, data do início dos exames. "Digo ao Ministro que irei fazer os exames para não aumentar o constrangimento do serviço. É também para não deixar para outro uma quantia de 6 ou 700 francos".

Nesse mesmo ano de 1854, foi nomeado reitor da nova faculdade de ciências da Universidade de Lille, onde iniciou seus estudos sobre fermentação. Foi nessa ocasião que Pasteur proferiu sua observação frequentemente citada: "dans les champs de l'observation, le hasard ne favorise que les esprits préparés" ("No campo da observação, o acaso favorece apenas a mente preparada").

Em 1857, mudou-se para Paris como diretor de estudos científicos na École Normale Supérieure, onde assumiu o controle de 1858 a 1867 e introduziu uma série de reformas para melhorar o padrão do trabalho científico. Os exames tornaram-se mais rígidos, o que levou a melhores resultados, maior competição e maior prestígio. Muitos de seus decretos, porém, foram rígidos e autoritários, levando a duas graves revoltas estudantis. Durante a "revolta do feijão" ele decretou que um ensopado de carneiro, que os alunos se recusavam a comer, seria servido e comido todas as segundas-feiras. Em outra ocasião, ele ameaçou expulsar qualquer aluno pego fumando e 73 dos 80 alunos da escola pediram demissão.

Em 1863, foi nomeado professor de geologia, física e química na École nationale supérieure des Beaux-Arts, cargo que ocupou até sua renúncia em 1867. Em 1867, tornou-se o cadeira de química orgânica na Sorbonne, mas depois desistiu do cargo por causa de problemas de saúde. Em 1867, o laboratório de química fisiológica da École Normale foi criado a pedido de Pasteur, e ele foi o diretor do laboratório de 1867 a 1888. Em Paris, ele fundou o Instituto Pasteur em 1887, em que foi seu diretor pelo resto de sua vida.

Pesquisa

Assimetria molecular

Pasteur separou as formas de cristal esquerda e direita um do outro para formar duas pilhas de cristais: na solução uma forma de luz girada à esquerda, o outro à direita, enquanto uma mistura igual das duas formas cancelou o efeito um do outro, e não gira a luz polarizada.

Nos primeiros trabalhos de Pasteur como químico, começando na École Normale Supérieure, e continuando em Estrasburgo e Lille, ele examinou as propriedades químicas, ópticas e cristalográficas de um grupo de compostos conhecido como tartarato.

Ele resolveu um problema sobre a natureza do ácido tartárico em 1848. Uma solução desse composto derivado de seres vivos girava o plano de polarização da luz que passava por ele. O problema era que o ácido tartárico derivado da síntese química não tinha esse efeito, embora suas reações químicas fossem idênticas e sua composição elementar fosse a mesma.

Pasteur notou que os cristais de tartaratos tinham faces pequenas. Então ele observou que, em misturas racêmicas de tartaratos, metade dos cristais eram destros e metade eram canhotos. Em solução, o composto destro era dextrógiro e o canhoto era levógiro. Pasteur determinou que a atividade óptica estava relacionada ao formato dos cristais e que um arranjo interno assimétrico das moléculas do composto era responsável pela distorção da luz. Os tartaratos de (2R,3R)- e (2S,3S)- eram isométricos, imagens especulares não sobreponíveis umas das outras. Esta foi a primeira vez que alguém demonstrou a quiralidade molecular e também a primeira explicação do isomerismo.

Alguns historiadores consideram o trabalho de Pasteur nesta área como suas "mais profundas e originais contribuições para a ciência", e sua "maior descoberta científica."

Fermentação e teoria dos germes das doenças

Pasteur foi motivado a investigar a fermentação enquanto trabalhava em Lille. Em 1856, um fabricante de vinho local, M. Bigot, cujo filho era um dos alunos de Pasteur, procurou seu conselho sobre os problemas de fazer álcool de beterraba e acidificar. Pasteur iniciou suas pesquisas no assunto repetindo e confirmando os trabalhos de Theodor Schwann, que demonstrou uma década antes que a levedura estava viva.

De acordo com seu genro, René Vallery-Radot, em agosto de 1857 Pasteur enviou um artigo sobre a fermentação do ácido láctico à Société des Sciences de Lille, mas o artigo foi lido três meses depois. Posteriormente, foi publicada uma memória em 30 de novembro de 1857. Na memória, ele desenvolveu suas idéias afirmando que: "pretendo estabelecer que, assim como existe um fermento alcoólico, o fermento da cerveja, que se encontra em todos os lugares que o açúcar é decomposto em álcool e ácido carbônico, assim também há um fermento particular, uma levedura láctica, sempre presente quando o açúcar se torna ácido lático."

Pasteur também escreveu sobre a fermentação alcoólica. Foi publicado na íntegra em 1858. Jöns Jacob Berzelius e Justus von Liebig propuseram a teoria de que a fermentação era causada pela decomposição. Pasteur demonstrou que essa teoria estava incorreta e que a levedura era responsável pela fermentação para produzir álcool a partir do açúcar. Ele também demonstrou que, quando um microrganismo diferente contaminava o vinho, o ácido lático era produzido, tornando o vinho azedo. Em 1861, Pasteur observou que menos açúcar fermentava por parte da levedura quando a levedura era exposta ao ar. A taxa mais baixa de fermentação aeróbica ficou conhecida como efeito Pasteur.

Pasteur experimentando em seu laboratório

Institut Pasteur de Lille

A pesquisa de Pasteur também mostrou que o crescimento de microrganismos era responsável pela deterioração de bebidas, como cerveja, vinho e leite. Com isso estabelecido, ele inventou um processo em que líquidos como o leite eram aquecidos a uma temperatura entre 60 e 100°C. Isso matou a maioria das bactérias e fungos já presentes dentro deles. Pasteur e Claude Bernard completaram testes de sangue e urina em 20 de abril de 1862. Pasteur patenteou o processo, para combater as "doenças" do vinho, em 1865. O método ficou conhecido como pasteurização, e logo foi aplicado à cerveja e ao leite.

A contaminação de bebidas levou Pasteur à ideia de que microrganismos que infectam animais e humanos causam doenças. Ele propôs impedir a entrada de microrganismos no corpo humano, levando Joseph Lister a desenvolver métodos antissépticos em cirurgia.

Em 1866, Pasteur publicou Etudes sur le Vin, sobre as doenças do vinho, e publicou Etudes sur la Bière em 1876, sobre as doenças da cerveja.

No início do século 19, Agostino Bassi havia demonstrado que a muscardina era causada por um fungo que infectava bichos-da-seda. Desde 1853, duas doenças chamadas pébrine e flacherie infectavam um grande número de bichos-da-seda no sul da França e, em 1865, causavam enormes perdas aos agricultores. Em 1865, Pasteur foi para Alès e trabalhou por cinco anos até 1870.

Os bichos-da-seda com pébrina estavam cobertos de corpúsculos. Nos primeiros três anos, Pasteur pensou que os corpúsculos eram um sintoma da doença. Em 1870, concluiu que os corpúsculos eram a causa da pébrina (hoje sabe-se que a causa é um microsporídio). Pasteur também mostrou que a doença era hereditária. Pasteur desenvolveu um sistema para prevenir a pébrina: depois que as mariposas fêmeas botavam seus ovos, as mariposas eram transformadas em polpa. A polpa era examinada ao microscópio e, se fossem observados corpúsculos, os ovos eram destruídos. Pasteur concluiu que as bactérias causavam flacherie. Atualmente, acredita-se que a principal causa sejam os vírus. A propagação da flacherie pode ser acidental ou hereditária. A higiene pode ser usada para prevenir a descamação acidental. As mariposas cujas cavidades digestivas não continham os microorganismos causadores da descamação eram usadas para botar ovos, evitando a descamação hereditária.

Geração espontânea

Garrafas en col de cigne (garrafa de pescoço de vaca) usado por Pasteur

O experimento de pasteurização de Louis Pasteur ilustra o fato de que a deterioração do líquido foi causada por partículas no ar em vez do próprio ar. Estes experimentos foram importantes peças de evidências que apoiam a teoria germinal da doença.

Após seus experimentos de fermentação, Pasteur demonstrou que a pele das uvas era a fonte natural de leveduras e que as uvas esterilizadas e o suco de uva nunca fermentavam. Ele extraiu o suco de uva sob a pele com agulhas esterilizadas e também cobriu as uvas com um pano esterilizado. Ambas as experiências não produziram vinho em recipientes esterilizados.

Suas descobertas e ideias foram contra a noção predominante de geração espontânea. Ele recebeu uma crítica particularmente severa de Félix Archimède Pouchet, que era diretor do Museu de História Natural de Rouen. Para resolver o debate entre os eminentes cientistas, a Academia Francesa de Ciências ofereceu o Prêmio Alhumbert de 2.500 francos a quem pudesse demonstrar experimentalmente a favor ou contra a doutrina.

Pouchet afirmou que o ar em todos os lugares poderia causar a geração espontânea de organismos vivos em líquidos. No final da década de 1850, ele realizou experimentos e afirmou que eram evidências de geração espontânea. Francesco Redi e Lazzaro Spallanzani forneceram algumas evidências contra a geração espontânea nos séculos XVII e XVIII, respectivamente. Os experimentos de Spallanzani em 1765 sugeriram que o ar contaminava os caldos com bactérias. Na década de 1860, Pasteur repetiu os experimentos de Spallanzani, mas Pouchet relatou um resultado diferente usando um caldo diferente.

Pasteur realizou vários experimentos para refutar a geração espontânea. Ele colocou o líquido fervido em um frasco e deixou o ar quente entrar no frasco. Então ele fechou o frasco e nenhum organismo cresceu nele. Em outro experimento, ao abrir frascos contendo líquido fervido, a poeira entrou nos frascos, fazendo com que organismos crescessem em alguns deles. O número de frascos nos quais os organismos cresceram foi menor em altitudes mais elevadas, mostrando que o ar em grandes altitudes continha menos poeira e menos organismos. Pasteur também usou frascos pescoço de cisne contendo um líquido fermentável. O ar foi autorizado a entrar no frasco por meio de um longo tubo curvo que fazia com que as partículas de poeira grudassem nele. Nada crescia nos caldos, a menos que os frascos fossem inclinados, fazendo com que o líquido tocasse as paredes contaminadas do gargalo. Isso mostrava que os organismos vivos que cresciam nesses caldos vinham de fora, na poeira, em vez de se gerarem espontaneamente dentro do líquido ou pela ação do ar puro.

Esses foram alguns dos experimentos mais importantes que refutaram a teoria da geração espontânea. Pasteur fez uma série de cinco apresentações de suas descobertas perante a Academia Francesa de Ciências em 1881, que foram publicadas em 1882 como Mémoire Sur les corpuscules organisés qui existente dans l'atmosphère: Examen de la doutrina des générations spontanées (Relato de corpúsculos organizados existentes na atmosfera: examinando a doutrina da geração espontânea). Pasteur ganhou o Prêmio Alhumbert em 1862. Ele concluiu que:

Nunca a doutrina da geração espontânea se recuperará do golpe mortal desta experiência simples. Não há nenhuma circunstância conhecida em que se possa confirmar que os seres microscópicos vieram ao mundo sem germes, sem pais semelhantes a si mesmos.

Doença do bicho-da-seda

Em 1865, Jean-Baptiste Dumas, químico, senador e ex-ministro da Agricultura e Comércio, pediu a Pasteur que estudasse uma nova doença que dizimava as fazendas de bichos-da-seda do sul da França e da Europa, a pébrine, caracterizada em escala macroscópica por manchas pretas e em escala microscópica pelos "corpúsculos de Cornália". Pasteur aceitou e fez cinco longas estadias em Alès, entre 7 de junho de 1865 e 1869.

Erros iniciais

Chegando a Alès, Pasteur familiarizou-se com a pébrina e também com outra doença do bicho-da-seda, conhecida antes da pebrina: a flacheria ou doença morta. Ao contrário, por exemplo, de Quatrefages, que cunhou a nova palavra pébrine, Pasteur comete o erro de acreditar que as duas doenças eram as mesmas e mesmo que a maioria das doenças dos bichos-da-seda conhecidas até então eram idênticos entre si e com pébrine. Foi em cartas de 30 de abril e 21 de maio de 1867 a Dumas que ele fez a distinção entre pébrine e flacherie.

Ele cometeu outro erro: começou negando o "parasitário" natureza (microbiana) da pébrina, que vários estudiosos (principalmente Antoine Béchamp) consideraram bem estabelecida. Mesmo uma nota publicada em 27 de agosto de 1866 por Balbiani, que a princípio Pasteur pareceu receber favoravelmente, não teve efeito, pelo menos imediatamente. "Pasteur está enganado. Ele só mudaria de ideia no decorrer de 1867".

Vitória sobre Pébrine

Numa época em que Pasteur ainda não compreendia a causa da pébrina, ele propagou um processo eficaz para estancar infecções: escolhia-se uma amostra de crisálidas, trituravam-se e procuravam-se os corpúsculos no material triturado; se a proporção de pupas corpusculares na amostra fosse muito baixa, a câmara era considerada boa para reprodução. Esse método de triagem de “sementes” (ovos) se aproxima de um método proposto por Osimo alguns anos antes, mas cujos testes não foram conclusivos. Por este processo, Pasteur reduz a pébrina e salva muitos da indústria da seda nas Cévennes.

Flacherie resiste

Em 1878, no Congrès international séricicole, Pasteur admitiu que "se a pébrine for vencida, a flacherie ainda exerce sua devastação". Ele atribuiu a persistência da flacherie ao fato de os fazendeiros não terem seguido seu conselho.

Em 1884, Balbiani, que desconsiderava o valor teórico do trabalho de Pasteur sobre as doenças do bicho-da-seda, reconheceu que seu processo prático havia remediado os estragos da pébrina, mas acrescentou que esse resultado tendia a ser contrabalançado pelo desenvolvimento da flacherie, que era menos conhecido e mais difícil de prevenir.

Apesar do sucesso de Pasteur contra a pébrine, a sericicultura francesa não foi salva de danos. (Veja fr:Séricculture na Wikipedia francesa.)

Imunologia e vacinação

Cólera de galinhas

O primeiro trabalho de Pasteur no desenvolvimento de vacinas foi sobre a cólera aviária. Ele recebeu as amostras de bactérias (mais tarde chamadas de Pasteurella multocida em homenagem a ele) de Henry Toussaint. Ele iniciou o estudo em 1877 e, no ano seguinte, conseguiu manter uma cultura estável usando caldos. Depois de mais um ano de cultivo contínuo, ele descobriu que as bactérias eram menos patogênicas. Algumas de suas amostras de cultura não podiam mais induzir a doença em galinhas saudáveis. Em 1879, Pasteur, planejando férias, instruiu seu assistente, Charles Chamberland, a inocular as galinhas com cultura de bactérias frescas. Chamberland esqueceu e saiu de férias. Ao retornar, ele injetou as culturas de um mês em galinhas saudáveis. As galinhas apresentaram alguns sintomas de infecção, mas em vez de as infecções serem fatais, como costumavam ser, as galinhas se recuperaram completamente. Chamberland presumiu que um erro havia sido cometido e queria descartar a cultura aparentemente defeituosa, mas Pasteur o impediu. Pasteur injetou nas galinhas recém-recuperadas bactérias frescas que normalmente matariam outras galinhas; as galinhas não apresentavam mais nenhum sinal de infecção. Ficou claro para ele que as bactérias enfraquecidas fizeram com que as galinhas se tornassem imunes à doença.

Em dezembro de 1880, Pasteur apresentou seus resultados à Academia Francesa de Ciências como "Sur les maladies virulentes et en particulier sur la maladie appelée vulgairement choléra des poules (Sobre doenças virulentas, e em particular sobre a doença comumente chamada de cólera de galinha)" e publicou-o no jornal da academia (Comptes-Rendus hebdomadaires des séances de l'Académie des Sciences). Ele atribuiu que as bactérias foram enfraquecidas pelo contato com o oxigênio. Ele explicou que as bactérias mantidas em recipientes lacrados nunca perdiam a virulência, e apenas aquelas expostas ao ar em meios de cultura poderiam ser usadas como vacina. Pasteur introduziu o termo "atenuação" por este enfraquecimento da virulência como ele apresentou perante a academia, dizendo:

Podemos diminuir a virulência do micróbio alterando o modo de culto. Este é o ponto crucial do meu assunto. Peço à Academia para não criticar, por enquanto, a confiança dos meus procedimentos que me permitem determinar a atenuação do micróbio, a fim de salvar a independência dos meus estudos e assegurar melhor o seu progresso... [Em conclusão] Eu gostaria de apontar para a Academia duas principais consequências para os fatos apresentados: a esperança de cultura de todos os micróbios e encontrar uma vacina para todas as doenças infecciosas que têm repetidamente afligido a humanidade, e são um grande fardo sobre a agricultura e criação de animais domésticos.

Na verdade, a vacina de Pasteur contra a cólera aviária não teve efeitos regulares e foi um fracasso.

Antraz

Na década de 1870, ele aplicou esse método de imunização ao antraz, que afetava o gado, e despertou o interesse no combate a outras doenças. Pasteur cultivou bactérias do sangue de animais infectados com antraz. Quando inoculou animais com a bactéria, surgiu o antraz, provando que a bactéria era a causadora da doença. Muitos bovinos estavam morrendo de antraz em "campos amaldiçoados". Pasteur foi informado de que ovelhas que morreram de antraz foram enterradas no campo. Pasteur pensou que as minhocas poderiam ter trazido as bactérias para a superfície. Ele encontrou a bactéria do antraz em minhocas. excremento, mostrando que ele estava certo. Ele disse aos fazendeiros para não enterrarem animais mortos nos campos. Pasteur vinha tentando desenvolver a vacina contra o antraz desde 1877, logo após a descoberta da bactéria por Robert Koch.

Louis Pasteur em seu laboratório, pintura por A. Edelfeldt em 1885

Em 12 de julho de 1880, Henri Bouley leu perante a Academia Francesa de Ciências um relatório de Henry Toussaint, um cirurgião veterinário, que não era membro da academia. Toussaint desenvolveu a vacina contra o antraz matando os bacilos por aquecimento a 55°C por 10 minutos. Ele testou em oito cães e 11 ovelhas, metade das quais morreram após a inoculação. Não foi um grande sucesso. Ao ouvir a notícia, Pasteur imediatamente escreveu à academia que não podia acreditar que a vacina morta funcionaria e que a afirmação de Toussaint "reverte todas as ideias que eu tinha sobre vírus, vacinas, etc." Após as críticas de Pasteur, Toussaint mudou para ácido carbólico para matar bacilos de antraz e testou a vacina em ovelhas em agosto de 1880. Pasteur pensou que esse tipo de vacina morta não deveria funcionar porque acreditava que bactérias atenuadas consumiam nutrientes que as bactérias precisava crescer. Ele achava que as bactérias oxidantes as tornavam menos virulentas.

Mas Pasteur descobriu que o bacilo do antraz não era facilmente enfraquecido pela cultura no ar enquanto formava esporos – ao contrário do bacilo da cólera de galinha. No início de 1881, ele descobriu que o cultivo de bacilos de antraz a cerca de 42 °C os tornava incapazes de produzir esporos e descreveu esse método em um discurso na Academia Francesa de Ciências em 28 de fevereiro. Em 21 de março, ele anunciou a vacinação bem-sucedida de ovelhas. A esta notícia, o veterinário Hippolyte Rossignol propôs que a Société d'agriculture de Melun organizasse um experimento para testar a vacina de Pasteur. Pasteur assinou o acordo do desafio em 28 de abril. Um experimento público foi conduzido em maio em Pouilly-le-Fort. Foram utilizados 58 ovinos, 2 caprinos e 10 bovinos, metade dos quais vacinados nos dias 5 e 17 de maio; enquanto a outra metade não foi tratada. Todos os animais foram injetados com a cultura virulenta fresca do bacilo do antraz em 31 de maio. O resultado oficial foi observado e analisado no dia 2 de junho na presença de mais de 200 espectadores. Todos os bovinos sobreviveram, vacinados ou não. Pasteur previu corajosamente: “Eu supus que as seis vacas vacinadas não ficariam muito doentes, enquanto as quatro vacas não vacinadas morreriam ou pelo menos ficariam muito doentes”. No entanto, todas as ovelhas e cabras vacinadas sobreviveram, enquanto as não vacinadas morreram ou estavam morrendo antes dos telespectadores. Seu relatório para a Academia Francesa de Ciências em 13 de junho conclui:

[Por] olhando para tudo a partir do ponto de vista científico, o desenvolvimento de uma vacinação contra o antraz constitui um progresso significativo além da primeira vacina desenvolvida por Jenner, uma vez que este último nunca foi obtido experimentalmente.

Pasteur não revelou diretamente como preparou as vacinas usadas em Pouilly-le-Fort. Embora seu relatório a indicasse como uma "vacina viva", seus cadernos de laboratório mostram que ele realmente usou a vacina morta com dicromato de potássio, desenvolvida por Chamberland, bastante semelhante ao método de Toussaint.

A noção de uma forma fraca de uma doença causando imunidade à versão virulenta não era nova; isso já era conhecido há muito tempo para a varíola. A inoculação com varíola (variolação) era conhecida por resultar em uma doença muito menos grave, e mortalidade muito reduzida, em comparação com a doença adquirida naturalmente. Edward Jenner também estudou a vacinação com varíola bovina (vaccinia) para dar imunidade cruzada à varíola no final dos anos 1790 e, no início dos anos 1800, a vacinação se espalhou para a maior parte da Europa.

A diferença entre a vacinação contra a varíola e a vacinação contra o antraz ou contra a cólera das galinhas era que os dois últimos organismos patogênicos haviam sido enfraquecidos artificialmente, de modo que uma forma naturalmente fraca do organismo causador da doença não precisava ser encontrada. Essa descoberta revolucionou o trabalho em doenças infecciosas, e Pasteur deu a essas doenças enfraquecidas artificialmente o nome genérico de "vacinas", em homenagem à descoberta de Jenner.

Em 1876, Robert Koch havia demonstrado que o Bacillus anthracis causava o antraz. Em seus trabalhos publicados entre 1878 e 1880, Pasteur apenas mencionou a obra de Koch em nota de rodapé. Koch conheceu Pasteur no Sétimo Congresso Médico Internacional em 1881. Alguns meses depois, Koch escreveu que Pasteur havia usado culturas impuras e cometido erros. Em 1882, Pasteur respondeu a Koch em um discurso, ao qual Koch respondeu agressivamente. Koch afirmou que Pasteur testou sua vacina em animais inadequados e que a pesquisa de Pasteur não era propriamente científica. Em 1882, Koch escreveu "On the Anthrax Inoculation", no qual refutou várias das conclusões de Pasteur sobre o antraz e criticou Pasteur por manter seus métodos secretos, tirar conclusões precipitadas e ser impreciso. Em 1883, Pasteur escreveu que usou culturas preparadas de maneira semelhante a seus experimentos de fermentação bem-sucedidos e que Koch interpretou mal as estatísticas e ignorou o trabalho de Pasteur sobre bichos-da-seda.

Erisipela suína

Em 1882, Pasteur enviou seu assistente Louis Thuillier ao sul da França por causa de uma epizootia de erisipela suína. Thuillier identificou o bacilo causador da doença em março de 1883. Pasteur e Thuillier aumentaram a virulência do bacilo após passá-lo por pombos. Em seguida, passaram o bacilo por coelhos, enfraquecendo-o e obtendo uma vacina. Pasteur e Thuillier descreveram incorretamente a bactéria como uma forma de oito. Roux descreveu a bactéria como em forma de bastão em 1884.

Raiva

"Hidrofobia", caricatura de Pasteur na revista de Londres Feira de Vanity, Janeiro 1887

Pasteur produziu a primeira vacina contra a raiva cultivando o vírus em coelhos e depois enfraquecendo-o secando o tecido nervoso afetado. A vacina anti-rábica foi inicialmente criada por Emile Roux, um médico francês e colega de Pasteur, que havia produzido uma vacina morta usando esse método. A vacina foi testada em 50 cães antes de seu primeiro teste em humanos. Esta vacina foi usada em Joseph Meister, de 9 anos, em 6 de julho de 1885, depois que o menino foi gravemente atacado por um cão raivoso. Isso foi feito com algum risco pessoal para Pasteur, já que ele não era um médico licenciado e poderia ter enfrentado um processo por tratar o menino. Depois de consultar os médicos, ele decidiu prosseguir com o tratamento. Ao longo de 11 dias, Meister recebeu 13 inoculações, cada inoculação usando vírus enfraquecidos por um período de tempo mais curto. Três meses depois, ele examinou Meister e descobriu que ele estava bem de saúde. Pasteur foi aclamado como um herói e a questão legal não foi levada adiante. A análise de seus cadernos de laboratório mostra que Pasteur tratou duas pessoas antes de vacinar Meister. Um sobreviveu, mas pode não ter tido raiva, e o outro morreu de raiva. Pasteur iniciou o tratamento de Jean-Baptiste Jupille em 20 de outubro de 1885, e o tratamento foi bem-sucedido. Mais tarde, em 1885, pessoas, incluindo quatro crianças dos Estados Unidos, foram ao laboratório de Pasteur para serem inoculadas. Em 1886, ele tratou 350 pessoas, das quais apenas uma desenvolveu raiva. O sucesso do tratamento lançou as bases para a fabricação de muitas outras vacinas. O primeiro dos Institutos Pasteur também foi construído com base nessa conquista.

Em A História de San Michele, Axel Munthe escreve sobre alguns riscos que Pasteur assumiu na pesquisa da vacina contra a raiva:

O próprio Pasteur era absolutamente destemido. Ansiosa para proteger uma amostra de saliva diretamente das mandíbulas de um cão raivoso, uma vez o vi com o tubo de vidro mantido entre os lábios desenhar algumas gotas da saliva mortal da boca de um bull-dog raivoso, realizada na mesa por dois assistentes, suas mãos protegidas por luvas de couro.

Por causa de seu estudo sobre germes, Pasteur incentivou os médicos a higienizar suas mãos e equipamentos antes da cirurgia. Antes disso, poucos médicos ou seus auxiliares praticavam esses procedimentos. Ignaz Semmelweis e Joseph Lister já haviam praticado a higienização das mãos em contextos médicos na década de 1860.

Controvérsias

Um herói nacional francês aos 55 anos, em 1878 Pasteur disse discretamente à sua família para nunca revelar seus cadernos de laboratório a ninguém. Sua família obedeceu e todos os seus documentos foram guardados e herdados em sigilo. Finalmente, em 1964, o neto de Pasteur e último descendente masculino sobrevivente, Pasteur Vallery-Radot, doou os papéis para a biblioteca nacional francesa. No entanto, os documentos foram restritos a estudos históricos até a morte de Vallery-Radot em 1971. Os documentos receberam um número de catálogo apenas em 1985.

Em 1995, centenário da morte de Louis Pasteur, o historiador da ciência Gerald L. Geison publicou uma análise dos cadernos particulares de Pasteur em seu The Private Science of Louis Pasteur, e declarou que Pasteur havia feito vários relatos enganosos e fingido em suas descobertas mais importantes. Max Perutz publicou uma defesa de Pasteur no The New York Review of Books. Com base em exames posteriores dos documentos de Pasteur, o imunologista francês Patrice Debré concluiu em seu livro Louis Pasteur (1998) que, apesar de sua genialidade, Pasteur tinha algumas falhas. Uma resenha de livro afirma que Debré "às vezes o considera injusto, combativo, arrogante, pouco atraente na atitude, inflexível e até dogmático".

Fermentação

Os cientistas antes de Pasteur estudaram a fermentação. Na década de 1830, Charles Cagniard-Latour, Friedrich Traugott Kützing e Theodor Schwann usaram microscópios para estudar leveduras e concluíram que as leveduras eram organismos vivos. Em 1839, Justus von Liebig, Friedrich Wöhler e Jöns Jacob Berzelius afirmaram que a levedura não era um organismo e era produzida quando o ar agia sobre o suco da planta.

Em 1855, Antoine Béchamp, professor de química na Universidade de Montpellier, realizou experimentos com soluções de sacarose e concluiu que a água era o fator de fermentação. Ele mudou sua conclusão em 1858, afirmando que a fermentação estava diretamente relacionada ao crescimento de bolores, que exigiam ar para crescer. Ele se considerava o primeiro a mostrar o papel dos microorganismos na fermentação.

Pasteur iniciou seus experimentos em 1857 e publicou suas descobertas em 1858 (edição de abril da Comptes Rendus Chimie, o artigo de Béchamp apareceu na edição de janeiro). Béchamp observou que Pasteur não trouxe nenhuma ideia ou experimento novo. Por outro lado, Béchamp provavelmente estava ciente dos trabalhos preliminares de Pasteur de 1857. Com os dois cientistas reivindicando prioridade na descoberta, uma disputa, que se estendeu por várias áreas, durou toda a vida.

No entanto, Béchamp estava do lado perdedor, como observou o obituário do BMJ: Seu nome foi "associado a controvérsias passadas quanto à prioridade que seria inútil recordar". Béchamp propôs a teoria incorreta das microzimas. De acordo com K. L. Manchester, antivivisseccionistas e proponentes da medicina alternativa promoveram Béchamp e microzimas, alegando injustificadamente que Pasteur plagiou Béchamp.

Pasteur pensava que o ácido succínico invertia a sacarose. Em 1860, Marcellin Berthelot isolou a invertase e mostrou que o ácido succínico não inverte a sacarose. Pasteur acreditava que a fermentação era devida apenas às células vivas. Ele e Berthelot se envolveram em uma longa discussão sobre o vitalismo, na qual Berthelot se opôs veementemente a qualquer ideia de vitalismo. Hans Buchner descobriu que a zimase (não uma enzima, mas uma mistura de enzimas) catalisava a fermentação, mostrando que a fermentação era catalisada por enzimas dentro das células. Eduard Buchner também descobriu que a fermentação poderia ocorrer fora das células vivas.

Vacina contra o antraz

Pasteur reivindicou publicamente seu sucesso no desenvolvimento da vacina contra o antraz em 1881. No entanto, seu admirador que se tornou rival, Henry Toussaint, foi quem desenvolveu a primeira vacina. Toussaint isolou a bactéria que causava a cólera das galinhas (mais tarde chamada Pasteurella em homenagem a Pasteur) em 1879 e deu amostras a Pasteur, que as usou em seus próprios trabalhos. Em 12 de julho de 1880, Toussaint apresentou seu resultado bem-sucedido à Academia Francesa de Ciências, usando uma vacina atenuada contra o antraz em cães e ovelhas. Pasteur, por ciúme, contestou a descoberta exibindo publicamente seu método de vacinação em Pouilly-le-Fort em 5 de maio de 1881. Pasteur então deu um relato enganoso sobre a preparação da vacina contra o antraz usada no experimento. Ele alegou que fez uma "vacina viva", mas usou dicromato de potássio para inativar esporos de antraz, um método semelhante ao de Toussaint. A experiência promocional foi um sucesso e ajudou Pasteur a vender seus produtos, obtendo os benefícios e a glória.

Ética experimental

Os experimentos de Pasteur são frequentemente citados como contrários à ética médica, especialmente na vacinação de Meister. Ele não tinha nenhuma experiência na prática médica e, mais importante, não tinha licença médica. Isso é frequentemente citado como uma séria ameaça à sua reputação profissional e pessoal. Seu parceiro mais próximo, Émile Roux, que tinha formação médica, recusou-se a participar do ensaio clínico, provavelmente por considerá-lo injusto. No entanto, Pasteur executou a vacinação do menino sob a vigilância de perto dos médicos praticantes Jacques-Joseph Grancher, chefe da clínica pediátrica do Hospital Infantil de Paris, e Alfred Vulpian, membro da Comissão de Raiva. Ele não tinha permissão para segurar a seringa, embora as inoculações estivessem inteiramente sob sua supervisão. Foi Grancher o responsável pelas injeções, e ele defendeu Pasteur perante a Academia Nacional de Medicina da França na questão.

Pasteur também foi criticado por manter segredo sobre seu procedimento e não realizar testes pré-clínicos adequados em animais. Pasteur afirmou que manteve seu procedimento em segredo para controlar sua qualidade. Mais tarde, ele revelou seus procedimentos a um pequeno grupo de cientistas. Pasteur escreveu que vacinou com sucesso 50 cães raivosos antes de usá-lo em Meister. Segundo Geison, os cadernos de laboratório de Pasteur mostram que ele vacinou apenas 11 cães.

Meister nunca apresentou nenhum sintoma de raiva, mas a vacinação não provou ser o motivo. Uma fonte estima a probabilidade de Meister contrair raiva em 10%.

Prêmios e homenagens

Pasteur recebeu 1.500 francos em 1853 da Sociedade Farmacêutica pela síntese do ácido racêmico. Em 1856, a Royal Society of London concedeu-lhe a Medalha Rumford por sua descoberta da natureza do ácido racêmico e suas relações com a luz polarizada, e a Medalha Copley em 1874 por seu trabalho sobre a fermentação. Ele foi eleito membro estrangeiro da Royal Society (ForMemRS) em 1869.

A Academia Francesa de Ciências concedeu a Pasteur o Prêmio Montyon de 1859 por fisiologia experimental em 1860, o Prêmio Jecker em 1861 e o Prêmio Alhumbert em 1862 por sua refutação experimental da geração espontânea. Embora tenha perdido as eleições em 1857 e 1861 para membro da Academia Francesa de Ciências, ele venceu a eleição de 1862 para membro da seção de mineralogia. Ele foi eleito secretário permanente da seção de ciências físicas da academia em 1887 e ocupou o cargo até 1889.

Em 1873, Pasteur foi eleito para a Académie Nationale de Médecine e nomeado comandante da Ordem da Rosa brasileira. Em 1881 foi eleito para um assento na Académie française deixado vago por Émile Littré. Pasteur recebeu a Medalha Albert da Royal Society of Arts em 1882. Em 1883 tornou-se membro estrangeiro da Royal Netherlands Academy of Arts and Sciences. Em 1885, foi eleito membro da American Philosophical Society. Em 8 de junho de 1886, o sultão otomano Abdul Hamid II concedeu a Pasteur a Ordem do Medjidie (I Classe) e 10.000 liras otomanas. Ele recebeu o Prêmio Cameron de Terapêutica da Universidade de Edimburgo em 1889. Pasteur ganhou a Medalha Leeuwenhoek da Academia Real Holandesa de Artes e Ciências por suas contribuições à microbiologia em 1895.

Pasteur foi feito Cavaleiro da Legião de Honra em 1853, promovido a Oficial em 1863, Comandante em 1868, Grande Oficial em 1878 e Grã-Cruz da Legião de Honra em 1881.

Pasteur Street (em inglês)Đưngng Pasteur) em Da Nang, Vietname

Legado

Vulitsya Pastera ou Pasteur Street em Odessa, Ucrânia

Em muitas localidades em todo o mundo, as ruas são nomeadas em sua homenagem. Por exemplo, nos EUA: Palo Alto e Irvine, Califórnia, Boston e Polk, Flórida, adjacentes ao Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Texas em San Antonio; Jonquière, Québec; San Salvador de Jujuy e Buenos Aires (Argentina), Great Yarmouth em Norfolk, no Reino Unido, Jericho e Wulguru em Queensland, Austrália; Phnom Penh no Camboja; Cidade de Ho Chi Minh e Da Nang, Vietnã; Batna na Argélia; Bandung na Indonésia, Teerã no Irã, perto do campus central da Universidade de Varsóvia em Varsóvia, Polônia; adjacente à Odessa State Medical University em Odessa, Ucrânia; Milão na Itália e Bucareste, Cluj-Napoca e Timișoara na Romênia. A Avenue Pasteur em Saigon, no Vietnã, é uma das poucas ruas daquela cidade a manter seu nome francês. A Avenue Louis Pasteur na área médica e acadêmica de Longwood em Boston foi nomeada em sua homenagem à maneira francesa com "Avenue" precedendo o nome do homenageado.

Tanto o Institut Pasteur quanto a Université Louis Pasteur receberam o nome de Pasteur. As escolas Lycée Pasteur em Neuilly-sur-Seine, França, e Lycée Louis Pasteur em Calgary, Alberta, Canadá, receberam o nome dele. Na África do Sul, o Louis Pasteur Private Hospital, em Pretória, e o Life Louis Pasteur Private Hospital, em Bloemfontein, levam seu nome. O Hospital Universitário Louis Pasteur em Košice, Eslováquia também recebeu o nome de Pasteur.

Louis Pasteur University Hospital, Košice, Eslováquia

Uma estátua de Pasteur é erguida na San Rafael High School em San Rafael, Califórnia. Um busto de bronze dele reside no campus francês do Kaiser Permanente's San Francisco Medical Center, em San Francisco. A escultura foi projetada por Harriet G. Moore e fundida em 1984 pela Artworks Foundry.

A Medalha UNESCO/Institut Pasteur foi criada no centenário da morte de Pasteur e é concedida a cada dois anos em seu nome, "em reconhecimento à pesquisa notável que contribui para um impacto benéfico na saúde humana' 34;.

O acadêmico francês Henri Mondor afirmou: "Louis Pasteur não era médico nem cirurgião, mas ninguém fez tanto pela medicina e cirurgia quanto ele."

Instituto Pasteur

Depois de desenvolver a vacina contra a raiva, Pasteur propôs um instituto para a vacina. Em 1887, teve início a arrecadação de fundos para o Instituto Pasteur, com doações de diversos países. O estatuto oficial foi registrado em 1887, afirmando que as finalidades do instituto eram "o tratamento da raiva segundo o método desenvolvido por M. Pasteur" e "o estudo de doenças virulentas e contagiosas". O instituto foi inaugurado em 14 de novembro de 1888. Ele reuniu cientistas de diversas especialidades. Os primeiros cinco departamentos foram dirigidos por dois graduados da École Normale Supérieure: Émile Duclaux (pesquisa em microbiologia geral) e Charles Chamberland (pesquisa microbiana aplicada à higiene), além de um biólogo, Élie Metchnikoff (pesquisa morfológica pesquisa de micróbios) e dois médicos, Jacques-Joseph Grancher (raiva) e Émile Roux (pesquisa técnica de micróbios). Um ano após a inauguração do instituto, Roux criou o primeiro curso de microbiologia já ministrado no mundo, então intitulado Cours de Microbie Technique (Curso de técnicas de pesquisa microbiana). Desde 1891 o Instituto Pasteur foi estendido a diferentes países, e atualmente são 32 institutos em 29 países em várias partes do mundo.

Vida pessoal

Pasteur em 1857

Pasteur casou-se com Marie Pasteur (nascida Laurent) em 1849. Ela era filha do reitor da Universidade de Estrasburgo e assistente científica de Pasteur. Eles tiveram cinco filhos juntos, três dos quais morreram ainda crianças. A filha mais velha, Jeanne, nasceu em 1850. Ela morreu de febre tifóide, aos 9 anos, enquanto estava no internato Arbois em 1859. Em 1865, Camille, de 2 anos, morreu de um tumor no fígado. Pouco depois, eles decidiram trazer Cécile do internato para casa, mas ela também morreu de febre tifóide em 23 de maio de 1866 aos 12 anos. Apenas Jean Baptiste (n. 1851) e Marie Louise (n. 1858) sobreviveram até a idade adulta. Jean Baptiste seria um soldado na Guerra Franco-Prussiana entre a França e a Prússia.

Fé e espiritualidade

Seu neto, Louis Pasteur Vallery-Radot, escreveu que Pasteur havia mantido de sua formação católica apenas um espiritismo sem prática religiosa. No entanto, observadores católicos costumavam dizer que Pasteur permaneceu um cristão fervoroso durante toda a sua vida, e seu genro escreveu, em uma biografia dele:

A fé absoluta em Deus e na Eternidade, e a convicção de que o poder para o bem que nos é dado neste mundo será continuado além dele, foram sentimentos que permearam toda a sua vida; as virtudes do evangelho sempre estiveram presentes a ele. Cheio de respeito pela forma de religião que tinha sido a de seus antepassados, ele veio simplesmente a ela e naturalmente para a ajuda espiritual nestas últimas semanas de sua vida.

O Literary Digest de 18 de outubro de 1902 dá esta declaração de Pasteur de que ele orava enquanto trabalhava:

A posteridade vai um dia rir da tolice dos filósofos materialistas modernos. Quanto mais estudo a natureza, mais me espanta com a obra do Criador. Rezo enquanto estou envolvido no meu trabalho no laboratório.

Maurice Vallery-Radot, neto do irmão do genro de Pasteur e católico declarado, também sustenta que Pasteur permaneceu fundamentalmente católico. De acordo com Pasteur Vallery-Radot e Maurice Vallery-Radot, a seguinte citação bem conhecida atribuída a Pasteur é apócrifa: “Quanto mais eu sei, mais minha fé se aproxima da do camponês bretão. Se eu pudesse saber tudo, teria a fé da esposa de um camponês bretão. Segundo Maurice Vallery-Radot, a citação falsa apareceu pela primeira vez logo após a morte de Pasteur. No entanto, apesar de sua crença em Deus, foi dito que suas opiniões eram mais de um livre-pensador do que de um católico, um espiritual mais do que um homem religioso. Ele também era contra misturar ciência com religião.

Morte

Em 1868, Pasteur sofreu um grave derrame cerebral que paralisou o lado esquerdo do corpo, mas ele se recuperou. Um derrame ou uremia em 1894 prejudicou gravemente sua saúde. Não conseguindo se recuperar totalmente, ele morreu em 28 de setembro de 1895, perto de Paris. Ele recebeu um funeral de estado e foi enterrado na Catedral de Notre Dame, mas seus restos mortais foram reenterrados no Instituto Pasteur em Paris, em uma abóbada coberta de representações de suas realizações em mosaicos bizantinos.

Publicações

As principais obras publicadas de Pasteur são: